BIO K 061/2 Monoscreen AbELISA BRSV / indirect, double wells

В тесте используются 96-луночные микротитровальные планшеты, сенсибилизированные моноклональными антителами, специфичными к F-белку вируса BRSV. Это антитело используется для улавливания рекомбинантного белка F. Нечетные лунки планшета (1, 3, 5, 7, 9 и 11) содержат рекомбинантный вирусный белок, тогда как четные лунки (2, 4, 6, 8, 10 и 12) содержат контрольный антиген. Таким образом, в планшете есть отрицательный контроль для дифференциации специфического антивирусного антитела от антител, направленных против контрольного антигена. Использование такого контроля значительно снижает количество ложных результатов.
Исследуемые сыворотки крови, плазмы или молока разводят буфером для разведения. Образцы добавляют в планшет, который затем инкубируют и промывают. В лунки добавляют конъюгат, меченое пероксидазой моноклональное антитело против бычьего IgG1. Затем планшет инкубируют второй раз при 21°С +/- 3°С, снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в тестируемых сыворотках присутствуют специфические иммуноглобулины BRSV, конъюгат остается связанным с микролункой, содержащей вирусный антиген, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигнал, считанный с микролунки отрицательного контроля, вычитается из сигнала положительной микролунки, сенсибилизированной вирусным антигеном. Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.