BIO K 238/2 Monoscreen AbELISA BoHV-1 / indirect, double wells

Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота (IBR) представляет собой инфекционное заболевание, вызываемое вирусом герпеса BoHV-1. Синдром обычно включает лихорадку и выделения из глаз и носа. Заболевание может сопровождаться энцефалитом и абортом. Возбудитель идентичен вирусу, вызывающему инфекционный пустуло-вагинит у крупного рогатого скота. Клинический диагноз заболевания обычно достаточно легко поставить. Серодиагностика имеет смысл только при резком повышении титра в парных образцах сыворотки. Профилактика может быть основана на вакцинации или уничтожении серопозитивных животных.

ПРИНЦИП РАБОТЫ ТЕСТА
В тесте используются 96-луночные планшеты для микротитрования, сенсибилизированные очищенным вирусом BoHV-1. Нечетные столбцы планшета (1, 3, 5, 7, 9 и 11) содержат вирус, тогда как четные столбцы (2, 4, 6, 8, 10 и 12) содержат контрольный антиген.
Исследуемые сыворотки и плазма крови разводятся в буфере для разведения. Образцы молока используются неразбавленными. Образец добавляют в планшет, который затем инкубируют и промывают. Конъюгат, меченный пероксидазой протеина G, добавляют в лунки. Планшет инкубируют второй раз при 21°С +/- 3°С. После второй инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Преимущество этого хромогена в том, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным. Если в исследуемой сыворотке или молоке присутствуют специфические иммуноглобулины BoHV-1, конъюгат остается связанным с микролункой, содержащей вирусный антиген, и фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру специфического антитела в образце. Сигнал, считанный с микролунки отрицательного контроля, вычитается из сигнала положительной микролунки, сенсибилизированной вирусным антигеном.
Можно количественно оценить реактивность неизвестного образца по шкале от 0 до +++++.