BIO K 314/1 Multiscreen AgELISA Calf digestive / sandwich, monowell

Диарея является основной причиной смертности у телят в течении первого месяца жизни. Бычий неонатальный гастроэнтерит часто является многофакторным заболеванием. Это может быть вызвано вирусами (коронавирус или ротавирус), бактериями (сальмонелла или E.coli F5) или протозойскими микроорганизмами, такими как Cryptosporidium. Диагноз этиологического агента диареи может быть по-ставлен только в лаборатории, поскольку невозможно различить эти микроорганизмы на основе клини-ческих признаков. Техника ИФА проста в использовании, не требует специального оборудования и хо-рошо подходит для анализа большого количества образцов. Тест быстрый и надежный; результаты можно оценить визуально, если спектрофотометрическое оборудование недоступно.

ПРИНЦИП РАБОТЫ ТЕСТА

В этом тесте микротитрационный планшет сенсибилизируется смесью антител, которые специ-фичны для 2 патогенных микроорганизмов (см. Диаграмму на последней странице). Эти антитела захва-тывают соответствующие патогены в образцах фекалий.
Образцы фекалий разбавляются и инкубируются на микропланшете в течение 1/2 часа при 21°C±3°C. Положительный и отрицательный контроль также наносятся на планшет.
Планшет инкубируется и промывается, а затем готовые к использованию конъюгаты добавляют-ся в лунки. Конъюгаты вы можете выбрать самостоятельно. Схема ниже – это пример расположения об-разцов и конъюгатов на планшете.
После второй инкубации в течение 1/2 часа при 21°C±3°C планшет снова промывается и добав-ляется хромогентетраметилбензидин (TMB). Этот хромоген имеет два преимущества: он более чувстви-тельный, чем другие хромогены пероксидазы, и не являются канцерогенным. Если в фекалиях присут-ствует один или несколько исследуемых патогенов, соответствующие конъюгаты остаются связанными с соответствующими микролунками, а фермент катализирует трансформацию бесцветного хромогена в синее соединение. Интенсивность полученного цвета пропорциональна титру патогена в образце.