BIO K 340/5 Multiscreen AgELISA Bovine respiratory / sandwich, double wells

Респираторные расстройства вызывают серьезную озабоченность у крупного рогатого скота, учитывая частоту таких инфекций и большое количество пораженных животных. Эти инфекции встречаются во всех странах, практикующих интенсивное животноводство, при котором большое количество животных содержится на небольших территориях. Лечение и диагностика затруднены в связи с многофакторностью этиологии этого заболевания. Вирусы и бактерии в сочетании со стрессом из-за перевозки в переполненных фургонах или грязных или плохо проветриваемых стойлах, например, играют ключевую роль в возникновении острых респираторных инфекций. Эти инфекции особенно распространены среди молодых животных, хотя они также поражают взрослых животных.
В большинстве случаев животные с признаками респираторных заболеваний являются носителями нескольких патогенов, некоторые из которых могут действовать синергически. Таким образом, общепризнанно, что вирусы являются первыми патогенами, которые вмешиваются, тогда как бактерии действуют как вторичные захватчики, ухудшающие состояние животного. Морская лихорадка является хорошим примером синергизма, который может существовать между вирусом (PI3) и бактерией, такой как Manheimia haemolytica, в дыхательных путях.
Набор можно использовать для постановки диагноза по пробе измельченной легочной ткани, взятой у трупа.

ПРИНЦИП РАБОТЫ ТЕСТА

Специфические антитела, продуцируемые против патогенов, вызывающих респираторные заболевания, иммобилизовали на чередующихся рядах 12 х 8-луночных микротитрационных планшетов. Эти антитела позволяют специфически захватывать соответствующие патогены в образцах. Ряды A, C, E, G были сенсибилизированы этими антителами, а ряды B, D, F, H содержат неспецифические антитела. Эти ряды позволяют различать специфические иммунологические реакции и неспецифическое связывание, чтобы исключить ложноположительные результаты.
Образцы разводят лизисным раствором и инкубируют на микропланшете в течение 1 часа при 21°С+/-3°С.
После этой первой стадии инкубации планшет промывают и инкубируют в течение 1 часа с конъюгатами, мечеными пероксидазой антивирусными специфическими моноклональными антителами. После этой второй инкубации планшет снова промывают и добавляют хромоген (тетраметилбензидин). Этот хромоген имеет то преимущество, что он более чувствителен, чем другие хромогены пероксидазы, и не является канцерогенным.
Если в тестируемых образцах присутствуют специфические патогены, конъюгаты остаются связанными с соответствующими микролунками, а фермент катализирует превращение бесцветного хромогена в пигментированное соединение. Интенсивность полученного синего цвета пропорциональна титру конкретных патогенов в образце. Ферментативную реакцию можно остановить подкислением, а полученную оптическую плотность при 450 нм можно зарегистрировать с помощью фотометра. Сигналы, зарегистрированные для микролунок отрицательного контроля, вычитают из соответствующих оптических плотностей положительных микролунок.
Положительный контроль предоставляется вместе с набором для подтверждения результатов теста.