Состав*:
Ингредиенты |
М1078 грамм/литр |
М1082 грамм/литр |
Часть А: |
||
Пептон специальный |
8,00 |
8,00 |
Дрожжевой экстракт |
2,00 |
3,00 |
Натрия дезоксихолат |
1,00 |
1,00 |
Натрия хлорид |
– |
5,00 |
Индикатор ВС |
2,00 |
2,00 |
Агар-агар |
12,00 |
12,00 |
Часть В: |
||
Пропиленгликоль |
10,00 |
10,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
|
|
* Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 10,0 г жидкости «Часть В» в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить 25,0 г порошка Части А (М1078) или 31,0 г порошка Части А (М1082). Прокипятить с частым помешиванием для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Остудить до 45-50°С, тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Эти среды представляют собой небольшую модификацию исходной прописи, предложенной Rambach (1), используемой для дифференциации сальмонелл от протеев и других энтеробактерий. Такие признаки, как ферментация лактозы и образование сероводорода учитывают на многих средах для идентификации и дифференциации сальмонелл (2), например, на Агаре Сальмонелла-Шигелла, КЛД-агаре и др. Образование кислоты из пропиленгликоля – новое свойство сальмонелл, которое использовано при составлении дифференциальных сред для сальмонелл.
Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают обильный рост бактерий, тогда как дезоксихолат придает среде селективные свойства в отношении кишечных бактерий, подавляя рост грамположительных микроорганизмов. В присутствии кислоты, образующейся из пропиленгликоля, индикатор ВС становится розовым. Способность ферментировать лактозу определяют с помощью индикатора на фермент b-галактозидазу. Лактозоположительные (обладающие b-галактозидазной активностью) бактерии образуют в присутствии индикатора вещество голубого цвета, которое окрашивает их колонии в такой же цвет (3).
Сальмонеллы образуют кислоту при ферментации пропиленгликоля и после взаимодействия с индикатором рН формируют типичные красные колонии. У других грамотрицательных кишечных бактерий формируются бесцветные колонии. Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis образуют красные колонии.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Часть А:
Гомогенный сыпучий розоватый порошок.
Часть В:
Бесцветная вязкая жидкость.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,2%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-оранжевую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы Части А М1078 (2,5% вес/об) или Части А М1082 (3,1% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) |
Рост |
Цвет колоний |
Salmonella enteritidis (13076) |
Обильный |
Красные |
Salmonella typhimurium (14028) |
Обильный |
Красные |
Salmonella typhi (6539) |
Обильный |
Бесцветные |
Escherichia coli (25922) |
Обильный |
Голубые |
Klebsiella pneumoniae (13883) |
Обильный |
Голубые |
Proteus mirabilis (25933) |
Обильный |
Бесцветные |
Shigella flexneri (12022) |
Обильный |
Бесцветные |
Staphylococcus aureus (25923) |
Подавляется |
– |